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尖翅燕鱼仔稚鱼脊柱及附肢骨骼系统的发育观察

郭华阳 刘明鉴 高杰 朱克诚 刘宝锁 郭梁 张楠 孙金辉 曾辰 杨静文 刘波 张殿昌

郭华阳, 刘明鉴, 高杰, 朱克诚, 刘宝锁, 郭梁, 张楠, 孙金辉, 曾辰, 杨静文, 刘波, 张殿昌. 尖翅燕鱼仔稚鱼脊柱及附肢骨骼系统的发育观察[J]. 南方水产科学, 2022, 18(6): 93-99. doi: 10.12131/20220058
引用本文: 郭华阳, 刘明鉴, 高杰, 朱克诚, 刘宝锁, 郭梁, 张楠, 孙金辉, 曾辰, 杨静文, 刘波, 张殿昌. 尖翅燕鱼仔稚鱼脊柱及附肢骨骼系统的发育观察[J]. 南方水产科学, 2022, 18(6): 93-99. doi: 10.12131/20220058
GUO Huayang, LIU Mingjian, GAO Jie, ZHU Kecheng, LIU Baosuo, GUO Liang, ZHANG Nan, SUN Jinhui, ZENG Chen, YANG Jingwen, LIU Bo, ZHANG Dianchang. Development of vertebral column and appendicular skeleton in larvae and juveniles of Platax teira[J]. South China Fisheries Science, 2022, 18(6): 93-99. doi: 10.12131/20220058
Citation: GUO Huayang, LIU Mingjian, GAO Jie, ZHU Kecheng, LIU Baosuo, GUO Liang, ZHANG Nan, SUN Jinhui, ZENG Chen, YANG Jingwen, LIU Bo, ZHANG Dianchang. Development of vertebral column and appendicular skeleton in larvae and juveniles of Platax teira[J]. South China Fisheries Science, 2022, 18(6): 93-99. doi: 10.12131/20220058

尖翅燕鱼仔稚鱼脊柱及附肢骨骼系统的发育观察

doi: 10.12131/20220058
基金项目: 国家重点研发计划项目 (2018YFD0901204);国家海洋水产种质资源库—南海种质资源分库国家海洋水产种质资源库项目;中国-东盟海洋生物活体种质资源库的构建和开发利用“中国-东盟海上合作基金”专项;广东省省级科技计划项目“南海海洋生物种质资源库建设与共享服务” (2019B030316030)
详细信息
    作者简介:

    郭华阳 (1987—),男,助理研究员,硕士,研究方向为水产遗传育种。E-mail: guohuayang198768@163.com

    通讯作者:

    张殿昌 (1977—),男,研究员,博士,研究方向为水产种质资源与遗传育种。E-mail: zhangdch@scsfri.ac.cn

  • 中图分类号: S 962

Development of vertebral column and appendicular skeleton in larvae and juveniles of Platax teira

  • 摘要: 掌握尖翅燕鱼 (Platax teira) 仔稚鱼脊柱及附肢骨骼系统的发育时序特征,可为其苗种繁育、环境适应及分类鉴定提供理论依据。采用软骨-硬骨双染色法对尖翅燕鱼仔稚鱼 [0~30日龄 (dah)] 脊柱、胸鳍、腹鳍、背鳍、臀鳍以及尾鳍进行染色观察与分析。结果表明,尖翅燕鱼有24枚脊椎骨,尾部骨骼由5枚尾下骨和2枚尾上骨构成,附肢支鳍骨的发育顺序为胸鳍、腹鳍、尾鳍、臀鳍和背鳍。尖翅燕鱼在初孵仔鱼已具备胸鳍支鳍骨原基和脊索,4 dah仔鱼胸鳍和腹鳍最先发育;7 dah仔鱼髓弓、脉弓开始出现;13 dah仔鱼骨骼形态和数量基本稳定;26 dah左右稚鱼开始骨化,脊柱和脊椎最先完成骨化;30 dah进入幼鱼阶段,其外表形态已经固定,与成鱼无异,典型特征为头部、躯干部和尾部各有3条黑色条带,身体呈雪白银色,受到外界刺激时体色瞬间变为黑色。尖翅燕鱼脊柱及附肢骨的发育顺序与其他海水鱼基本一致,但骨骼发育时间节点和数量有所不同。
  • 图  1  尖翅燕鱼培养过程中的饲养方案和日龄与全长回归方程

    Figure  1.  Feeding scheme and regression equation of age and full length during P. teira culture

    图  2  尖翅燕鱼不同阶段发育的过程

    注:a. 5 日龄仔鱼;b. 21 日龄稚鱼;c. 30 日龄幼鱼;d. 30 日龄幼鱼-应激后。

    Figure  2.  Different developmental stages of P. teira

    Note: a. 5 dah larva; b. 21 dah larva; c. 30 dah larva; d. 30 dah larva-after stress.

    图  3  尖翅燕鱼部分脊柱发育的过程

    注:a. 2 日龄仔鱼;b. 7 日龄仔鱼;c. 10 日龄仔鱼;d. 15 日龄仔鱼;e. 23 日龄仔鱼;f. 30 日龄稚鱼。

    Figure  3.  Development of partial vertebral column in P. teira

    Note: a. 2 dah larvae; b. 7 dah larvae; c. 10 dah larvae; d.15 dah larvae; e. 23 dah larvae; f. 30 dah juvenile.

    图  4  尖翅燕鱼尾鳍的发育过程

    注:a. 2 日龄仔鱼;b. 7 日龄仔鱼;c. 9 日龄仔鱼;d. 13 日龄仔鱼;e. 18 日龄仔鱼;f. 25 日龄稚鱼。

    Figure  4.  Development of caudal fin in P. teira

    Note: a. 2 dah larva; b. 7 dah larva; c. 9 dah larva; d. 13 dah larva; e. 18 dah larva; f. 25 dah juvenile.

    图  5  尖翅燕鱼背鳍、臀鳍、胸鳍和腹鳍的发育过程

    注:a. 2 日龄仔鱼;b. 4 日龄仔鱼;c. 8 日龄仔鱼;d. 9 日龄仔鱼;e. 13 日龄仔鱼;f. 26 日龄稚鱼。

    Figure  5.  Development of the dorsal, anal, pectoral and pelvic fins of P. teira

    Note: a. 2 dah larva; b. 4 dah larva; c. 8 dah larva; d. 9 dah larva; e. 13 dah larva; f. 26 dah juvenile.

    表  1  阿尔新蓝-茜素红S染色法

    Table  1.   Alcian blue and alizarin red S staining technique

    染色步骤  
    Staining step  
    实验过程
    Experimental process
    样本处理
    Sample treatment
    将仔稚鱼麻醉,测量体长和全长,注意不要采集外形畸形的样品,用10%的甲醛溶液浸泡样本,4 ℃条件下浸泡超过24 h,完成样品的固定。
    脱水
    Dehydration
    取出固定样品后,用纱布包裹样品,蒸馏水浸泡至少24 h (中间多换几次蒸馏水),或用自来水流水冲洗过夜,以清除固定剂。再用不同浓度的乙醇梯度脱水,乙醇溶液浓度依次为:50%、75%、90%和100%,脱水时间均为6 h。
    软骨染色
    Cartilage staining
    从脱水液中取出的样品,直接浸入软骨染色液 (将无水乙醇和冰醋酸1∶1混合,加入 0.3 g阿利新蓝粉末,配置成1 000 mL溶液) 中,染色24 h,期间可以更换染液。
    漂洗
    Rinsing
    在光线较强的环境下进行操作,观察到样品染色好后,从软骨染色液中取出样品放入漂洗液 [将30%的过氧化氢 (H2O2) 和蒸馏水按照1∶5混合配制成1 000 mL溶液,并加入8 g氢氧化钾 (KOH)] 中,不间断用玻璃棒搅拌,直到样品表面颜色变淡。
    中和
    Neutralize
    将漂洗好的样品放入染色中和液 [蒸馏水中加入过量硼砂 (Na2B4O7),得饱和硼砂溶液即可] 中进行中和,时间为20~24 h。
    硬骨染色
    Bone staining
    将样品放入硬骨染色液 (1 000 mL蒸馏水中加入8 g 氢氧化钾 (KOH) 完全溶解后,再加入0.3~0.5 g茜素红粉末) 中,每隔12 h取出样品观察染色情况,直至染色完成。
    酶解
    Zymolysis
    将样本浸泡在酶溶液 (将1.25 g重金属螯合剂EDTA-Na2和4.5 g胰蛋白酶溶解于1 000 mL饱和硼砂溶液) 中,根据酶解程度调整消化时间,直至稍见骨骼即可,中间最好更换酶解液。
    保存
    Preservation
    用蒸馏水清洗样本,然后依次移入体积比为3∶1、1∶1、1∶3的1% KOH-甘油合剂中,最后保存于纯甘油中,并加入3~4 粒麝香草酚保存。
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出版历程
  • 收稿日期:  2022-03-09
  • 修回日期:  2022-04-25
  • 录用日期:  2022-06-01
  • 网络出版日期:  2022-06-10
  • 刊出日期:  2022-12-05

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