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黄鳍棘鲷精子冷冻保存方法探究

贾濮元 郭华阳 朱克诚 刘宝锁 郭梁 张楠 江世贵 张殿昌

贾濮元, 郭华阳, 朱克诚, 刘宝锁, 郭梁, 张楠, 江世贵, 张殿昌. 黄鳍棘鲷精子冷冻保存方法探究[J]. 南方水产科学. doi: 10.12131/20210083
引用本文: 贾濮元, 郭华阳, 朱克诚, 刘宝锁, 郭梁, 张楠, 江世贵, 张殿昌. 黄鳍棘鲷精子冷冻保存方法探究[J]. 南方水产科学. doi: 10.12131/20210083
Puyuan JIA, Huayang GUO, Kecheng ZHU, Baosuo LIU, Liang GUO, Nan ZHANG, Shigui JIANG, Dianchang ZHANG. Cryopreservation of sperm of Acanthopagrus latus[J]. South China Fisheries Science. doi: 10.12131/20210083
Citation: Puyuan JIA, Huayang GUO, Kecheng ZHU, Baosuo LIU, Liang GUO, Nan ZHANG, Shigui JIANG, Dianchang ZHANG. Cryopreservation of sperm of Acanthopagrus latus[J]. South China Fisheries Science. doi: 10.12131/20210083

黄鳍棘鲷精子冷冻保存方法探究

doi: 10.12131/20210083
基金项目: 广东省基础与应用基础研究基金联合基金青年基金项目 (2019A1515110309);国家科技基础条件平台建设运行项目 (2019DKA30470);中国水产科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助 (2020TD29);国家自然科学基金项目 (U20A2064)
详细信息
    作者简介:

    贾濮元 (1996—),男,硕士研究生,研究方向为水产动物营养和遗传育种。E-mail: pyjiawin@163.com

    通讯作者:

    张殿昌 (1977—),男,博士,研究员,从事水产种质资源与遗传育种研究。E-mail: zhangdch@scsfri.ac.cn

  • 中图分类号: S 917.4

Cryopreservation of sperm of Acanthopagrus latus

  • 摘要: 黄鳍棘鲷 (Acanthopagrus latus) 是中国具重要商业价值的海水鱼类之一,对其精子开展冷冻保存可为黄鳍棘鲷育种提供一定的技术支持,有效预防其种质资源衰退,保持其养殖业的可持续发展。该研究以黄鳍棘鲷精子为实验材料,对其精子冷冻保存的稀释液、葡萄糖浓度、抗冻剂种类及浓度、精子与保护液稀释比例和降温程序等进行了筛选优化。结果表明,以含10 g·L−1葡萄糖、5%乙二醇的MPRS溶液与精子按1∶2的比例稀释,4 ℃平衡30 min,液氮面上5 cm熏蒸5 min,最后投入液氮保存2 h,将黄鳍棘鲷冷冻精子于37 ℃水浴解冻后活性最好,精子活力、运动时间和寿命可分别达到 (85.17±3.66)%、(9.16±7.70) s和 (94.29±9.55) s。
  • 图  1  不同葡萄糖质量浓度对精子活力、精子运动时间和精子寿命的影响

    精子运动时间和精子寿命以左边纵轴为准,精子活力以右边纵轴为准;不同字母表示组间差异显著 (P<0.05);后图同此。

    Figure  1.  Effects of different glucose concentration on sperm motility, sperm movement time and sperm life span

    Sperm movement time and sperm life are based on the left vertical axis, and sperm motility is based on the right vertical axis; different letters indicate significant difference among the groups (P<0.05); the same case in the following figures.

    图  2  同种稀释液、不同浓度的4种抗冻剂对精子活力的影响

    Figure  2.  Effects of different concentrations of 4 kinds of cryoprotectant on sperm motility with same solution as diluent

    图  3  冷冻保存中不同稀释比例对精子活力、精子运动时间和精子寿命的影响

    Figure  3.  Effects of different dilution ratios on sperm motility, sperm movement time and sperm life span

    图  4  冷冻保存中不同液氮液面上方高度对精子活力、精子运动时间和精子寿命的影响

    Figure  4.  Effects of different height above liquid nitrogen surface on sperm motility, sperm movement time and sperm life span

    表  1  黄鳍棘鲷精子稀释液组成成分

    Table  1.   Composition of spermatozoon diluent of A. latus

    成分
    Ingredient/(g·L−1)
    汉克斯液
    Hank's
    MPRS科特兰液
    Cortland
    RS
    氯化钠 NaCl 8.01 3.53 7.25 6.50
    氯化钾 KCl 0.40 0.24 0.38 0.39
    二水氯化钙 CaCl2·2H2O 0.14 0.17 0.18 0.12
    碳酸氢钠 NaHCO3 0.35 0.25 1.00 0.20
    磷酸二氢钾 KH2PO4 0.06
    六水氯化镁 MgCl2·6H2O 0.10 0.19
    七水硫酸镁 MgSO4·7H2O 0.10 0.23
    十二水磷酸氢二钠
    Na2HPO4·12H2O
    0.06
    磷酸二氢钠 NaH2PO4 0.22 0.41 0.01
    葡萄糖 Glucose 10 11 1
    胎牛血清 FBS 10 10
    注:−. 稀释液中不含该成分。 Note: −. The diluent does not contain the ingredient.
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    表  2  黄鳍棘鲷新鲜精子加入4种稀释液以及激活前后活力对比

    Table  2.   Comparison of sperm activity before and after addition of four diluents to fresh sperm of A. latus

    新鲜精子
    活力
    Fresh sperm
    motility/%
    加入稀释液
    Add diluent
    加入稀释液后
    精子活力
    Sperm motility after
    adding diluent/%
    加入激活液后
    精子活力
    Sperm motility after
    adding activator/%
    94.83±1.47a 汉克斯液 Hank's 84.67±1.75b 74.50±4.18c
    MPRS 2.00±1.41d 90.17±2.79b
    科特兰液 Cortland 5.00±2.61d 33.17±4.07d
    RS 25.83±4.92c 72.50±5.01c
    注:不同小写字母表示组间差异显著 (P<0.05)。 Note: Values with different letters in the same column are significantly different (P<0.05).
    下载: 导出CSV
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出版历程
  • 收稿日期:  2021-03-19
  • 修回日期:  2021-05-28
  • 录用日期:  2021-06-21
  • 网络出版日期:  2021-06-30

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