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基于鲤疱疹病毒3型ORF65基因的DNA疫苗对建鲤鱼苗的免疫保护研究
李盈, 刘振兴, 马艳平, 曹俊明, 马江耀, 郝乐, 梁志凌, 柯浩, 李玉谷
2019, 15(4): 122-126. doi: 10.12131/20190033
为开发针对鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3) [ 又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)] 的DNA疫苗,该研究将CyHV-3 ORF65插入pEGFP-N1,构建pEGFP-ORF65重组质粒,通过转染实验与活体成像实验证实pORF65-EGFP融合蛋白可以在建鲤(Cyprinus carpio var. Jian)体外、体内表达;重组质粒按照3 μg·尾−1的剂量尾柄肌肉注射免疫10 g左右的建鲤鱼苗,免疫3次,ELISA检测表明pEGFP-ORF65免疫后可以显著提高血清特异性抗体水平;攻毒实验显示,CyHV-3攻毒21 d后,PBS组、pEGFP-N1组和pEGFP-ORF65组的建鲤成活率分别为25%、30%和90%,攻毒建鲤的成活率显著提高(P<0.01)。该研究为ORF65作为DNA疫苗靶基因应用于CyHV-3的防控提供了依据。
关键词: 鲤疱疹病毒3型, 锦鲤疱疹病毒, ORF65, DNA疫苗, ELISA