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5种鲈形目淡水鱼肌肉脂肪酸及磷脂组成的研究
韩迎雪, 林婉玲, 杨少玲, 李来好, 黄卉, 杨贤庆, 王锦旭, 吴燕燕, 翟红蕾, 郝淑贤
2019, 15(1): 85-92. doi: 10.12131/20180184
为研究鲈形目淡水鱼在不同科和种间脂肪酸及磷脂组成的差异,该研究以高体革䱨 (Scortum barcoo)、赤鲈(Perca fluviatilis)、梭鲈(Lucioperca lucioperca)、大口黑鲈(Micropterus salmoides)和罗非鱼(Oreochromis mossambicus)为对象,采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)、高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)对以上5种鱼肌肉中的脂肪酸与磷脂进行了分析。结果表明,5种淡水鱼肌肉中共检测出21种脂肪酸,共有的脂肪酸有8种,分别为C14:0,C16:0,C18:0,C16:1,C18:1,C18:2,C20:5和C22:6。多不饱和脂肪酸(PUFA)含量丰富,PUFA含量除高体革䱨为26.81%之外,其他均大于35%。5种淡水鱼肌肉中共检出6种磷脂,分别为磷脂酰乙醇胺(PE)、鞘磷脂(SM)、磷脂酰肌醇(PI)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰胆碱(PC)。5种鱼肌肉磷脂中PC含量最高,占据磷脂总量的45.84%~62.55%,PE和PI次之,PS和SM含量相对较少,仅占总磷脂的2.19%~5.27%和2.06%~3.65%。
关键词: 淡水鱼类, 鲈形目, 脂肪酸, 磷脂
多壁碳纳米管固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定织纹螺中河豚毒素
孙博伦, 王旭峰, 李来好, 赵东豪, 王强, 黎智广, 蔡楠, 关婉琪
2018, 14(5): 103-108. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.05.013
建立了多壁碳纳米管(MWCNTs)固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定织纹螺中河豚毒素(TTX)的方法,样品用1%乙酸甲醇溶液提取,调节pH至8.5~9.0后,采用碳纳米管净化处理后上机测定。以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,经Amide柱梯度洗脱,以电喷雾离子源正离子模式,多反应监测(MRM)测定,外标法定量。在0.3~50 ng·mL–1质量浓度范围内,相关系数(R)大于0.999,加标回收率为83.7%~91.4%,相对标准偏差为2.3%~8.6%,检测限和定量限分别为0.3 μg·kg–1和1 μg·kg–1。该方法适用于织纹螺中TTX的检测。
关键词: 河豚毒素, 织纹螺, 多壁碳纳米管, 液相色谱-质谱联用检测法, 固相萃取
调理脆肉鲩鱼片冷藏过程风味成分变化
林婉玲, 丁莫, 李来好, 王锦旭, 翟红蕾, 杨贤庆, 吴燕燕, 郝淑贤, 黄卉
2018, 14(4): 112-121. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.04.014
为了改进脆肉鲩(Ctenopharyngodon idellus)鱼片的冷冻品质,利用紫苏(Perilla frutescens)水提物对脆肉鲩鱼片进行处理,采用固相微萃取(SPME)和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,对鱼片冷藏过程风味成分变化进行分析。结果显示,共检测出挥发性成分70种,其中醛类和醇类相对百分含量较多;冷藏过程中醛类物质相对百分含量呈现先上升后降低的趋势,对鱼片风味起主要作用,壬醛和(E,E) 2,4-癸二烯醛冷藏第8天相对百分含量最高(分别为15.84%和6.07%),随后出现下降;冷藏第16天,1-辛烯-3-醇相对百分含量增长10.01%,鱼片腥味加重;芳樟醇相对百分含量越来越低,对鱼片整体风味影响效果逐渐降低;酯类物质相对百分含量减少85.19%,对鱼片风味影响程度逐步降低;冷藏第8天,2,3-辛二酮相对百分含量为8.77%,比第0天增加4.56%。同时检测到酮类中β-紫罗兰酮相对百分含量随冷藏时间延长而大幅度降低,第16天降低95.87%,其具有特殊香味且阈值较低,对风味有一定贡献。此外,检测到的其他物质因为其感觉阈值过高或相对百分含量较低,对鱼片整体风味的影响可以忽略。
关键词: 脆肉鲩, 紫苏叶水提物, 挥发性风味物质, 冷藏
麻醉剂丁香酚对鳗弧菌抑菌效果初步研究
李朝, 柯常亮, 古小莉, 李惠青, 黎智广, 黄珂, 李刘冬, 李来好
2019, 15(2): 58-63. doi: 10.12131/20180194
水产麻醉剂丁香酚具有良好的抑菌和杀菌作用,不仅对食源性致病菌具有良好的抑制作用,也对水产致病菌具有潜在的抑菌效力。为探讨丁香酚对水产养殖业主要致病菌的抑菌作用,文章初步开展了丁香酚对鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的抑菌效果研究。丁香酚质量浓度为6 400 μg·mL–1时,鳗弧菌培养平板中抑菌圈直径为(21.13±0.74) mm,表明鳗弧菌对此浓度的丁香酚表现为极敏。吸光度测定结果显示微孔中丁香酚质量浓度≥400 μg·mL–1时弧菌没有生长,表明丁香酚对鳗弧菌的最低抑菌浓度(MIC)为400 μg·mL–1。取400 μg·mL–1、800 μg·mL–1和1 600 μg·mL–1微孔中溶液涂抹于培养平板继续培养24 h,质量浓度≥800 μg·mL–1时鳗弧菌没有生长,表明最小杀菌浓度(MBC)为800 μg·mL–1。研究结果表明丁香酚对鳗弧菌具有良好的抑菌作用。
关键词: 丁香酚, 鳗弧菌, 抑菌圈, 最低抑菌浓度, 最小杀菌浓度, 渔用麻醉剂
罗非鱼片微酸性电解水杀菌工艺响应面法优化研究
于福田, 岑剑伟, 李来好, 杨贤庆, 黄卉, 郝淑贤, 魏涯, 赵永强, 林织
2019, 15(1): 77-84. doi: 10.12131/20180164
为研究微酸性电解水对新鲜罗非鱼片的杀菌效果,以杀菌对数值为指标,进行单因素和响应面实验,建立各因素与响应值之间的数学模型,确定最佳杀菌条件。结果表明,最佳杀菌条件为有效氯质量浓度35.00 mg·L–1,浸泡时间22 min,料液质量体积比1∶6,在此处理条件下,杀菌对数值为(0.735±0.001) lg (CFU·g–1),杀菌率为(81.59±0.04)%。
关键词: 罗非鱼片, 微酸性电解水, 响应面, 杀菌
超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼粉中喹噁啉类药物及其主要代谢物的残留量
江永远, 王强, 李来好, 王旭峰, 赵东豪, 蔡楠, 关婉琪
doi: 10.12131/20180278
文章建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼粉中5种喹噁啉类药物及其2种主要代谢物残留量的方法。样品经乙腈-乙酸乙酯(1∶1, V/V)和1 mol·L–1盐酸分步提取,盐酸提取液进一步用乙酸乙酯反萃取,有机相经浓缩后,均用乙腈复溶,用PRiME HLB通过性固相萃取柱净化处理。样品以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,经Phenomenex Kinetex C18柱梯度洗脱分离,质谱采取正离子多反应监测模式进行检测。代谢物采用内标法定量,原药采用基质匹配外标法定量。结果表明,7种化合物在对应的浓度范围内线性关系良好(r≥0.994),2种代谢产物检测限为2 μg·kg–1,定量限为5 μg·kg–1;5种喹噁啉类药物检测限为1~10 μg·kg–1;定量限为2~20 μg·kg–1。在高、中、低3种添加浓度下7种化合物的平均回收率为64.4%~102.2%,相对标准偏差为3.2%~10.2%。方法灵敏度高、精密度好,能同时测定鱼粉中的喹噁啉类药物及其主要代谢物。
关键词: 超高效液相色谱-串联质谱法, 喹噁啉类药物, 代谢物, 鱼粉, 残留检测
孔雀石绿降解菌Enterobacter sp. B-20的分离、鉴定和降解特性研究
刘单单, 李春生, 杨贤庆, 陈胜军, 邓建朝, 王悦齐, 李来好
2018, 14(1): 50-59. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.01.007
从受孔雀石绿污染的淡水鱼养殖池塘底泥中,筛选到一株孔雀石绿(C23H25ClN2,malachite green,MG)高效降解菌,经16S rRNA基因序列及系统进化树分析,初步鉴定为Enterobacter sp. B-20。采用硼氢化钾(KBH4)还原-高效液相色谱法对Enterobacter sp. B-20的孔雀石绿降解特性进行研究。结果显示,孔雀石绿对菌株的生长有一定抑制作用,24 h内菌株对5~20 mg·L–1孔雀石绿降解率超过97%,12 h内对1~40 mg·L–1孔雀石绿降解率超过82%。菌株的孔雀石绿降解能力随着pH的增加而显著提高,最适降解pH为9。Enterobacter sp. B-20具有较强的耐盐性,在10~40 g·L–1 的氯化钠(NaCl)质量浓度下具有稳定的孔雀石绿降解特性。在高浓度金属离子条件下,Enterobacter sp. B-20表现出较强的耐性及稳定的孔雀石绿降解能力,0.1~1 mmol·L–1铁离子(Fe3+)、0.1~0.5 mmol·L–1铜离子(Cu2+)、0.1 mmol·L–1锰离子(Mn2+)、0.1~1 mmol·L–1铅离子(Pb2+)均能显著提高菌株的孔雀石绿降解率。结果表明,Enterobacter sp. B-20具有在复杂养殖水环境下降解孔雀石绿的应用潜力。
关键词: 孔雀石绿, Enterobacter sp., 降解特性, 高效液相色谱, 系统进化树
4种硝基呋喃类代谢物在青石斑鱼肌肉中的富集与消除规律
丁军伟, 邓建朝, 杨贤庆, 岑剑伟, 李来好, 陈胜军
2018, 14(1): 60-67. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.01.008
实验通过连续7 d投喂各含有100 mg·kg–1呋喃西林、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃妥因的饲料,研究4种硝基呋喃药物在青石斑鱼(Epinephelus awoara)肌肉中的消除规律。采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测青石斑鱼肌肉中的氨基脲(SEM)、3-氨基-2-恶唑基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)和1-氨基-2-内酰脲(AHD)的质量分数,并用内标法定量。结果表明,SEM、AOZ、AMOZ和AHD在石斑鱼背肌的峰浓度最大值依次为1 104.10 μg·kg–1、781.09 μg·kg–1、679.75 μg·kg–1和437.18 μg·kg–1。4种硝基呋喃代谢物在石斑鱼肌肉组织中的消除规律大致相似。SEM、AHD、AOZ和AMOZ半衰期时间的长短顺序为23.90 d、23.10 d、22.35 d和21.00 d。SEM在肌肉中消除最慢。消除到第163天时,SEM、AOZ、AMOZ和AHD在肌肉中的质量分数仍然高于液质检出限(0.5 μg·kg–1)。建议硝基呋喃药物应禁止用于石斑鱼疾病的预防或治疗中。
关键词: 青石斑鱼, 硝基呋喃药物, 消除规律, 超高效液相串联质谱
糖基化鸢乌贼肌原纤维蛋白体外消化产物抗氧化性研究
仇超颖, 荣婧, 胡晓, 杨贤庆, 李来好, 黄卉
2018, 14(6): 105-112. doi: 10.12131/20180074
将鸢乌贼(Symplectoteuthis oualaniensis)肌原纤维蛋白与褐藻寡糖进行糖基化反应,并采用胃蛋白酶和胰酶对蛋白进行体外消化,分析糖基化改性对蛋白消化产物抗氧化活性和氨基酸组成的影响。结果显示,肌原纤维蛋白与褐藻寡糖在反应过程中自由氨基浓度显著降低,且反应前12 h降低更为明显,表明二者之间发生了明显的接枝反应。糖基化肌原纤维蛋白的DPPH自由基清除率及还原力在模拟消化前后均显著高于未接枝肌原纤维蛋白(P<0.05),因此接枝物具有更高的抗氧化能力。消化后蛋白自由基清除能力及还原力均降低。SDS-PAGE电泳图谱表明,肌原纤维蛋白与褐藻寡糖接枝反应促使高分子量蛋白接枝物的生成。酶解后糖基化肌原纤维蛋白的小分子蛋白、多肽的产生量明显增多,表明糖基化促进了蛋白水解反应。氨基酸分析显示,肌原纤维蛋白接枝物酶解液中总必需氨基酸含量减少而疏水性氨基酸含量增加。
关键词: 鸢乌贼, 肌原纤维蛋白, 糖基化, 体外消化, 抗氧化活性
鸢乌贼肌原纤维蛋白糖基化产物功能特性研究
荣婧, 仇超颖, 胡晓, 杨贤庆, 李来好
2018, 14(1): 68-76. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.01.009
以葡聚糖、褐藻寡糖、葡萄糖、乳糖为糖基供体实现对鸢乌贼(Symplectoteuthis oualaniensis)肌原纤维蛋白糖基化改性,分析了不同糖的种类及改性时间对蛋白溶解性、结构、乳化性、起泡性等功能性质的影响。结果表明,肌原纤维蛋白与不同种类的糖质量比1∶1反应12 h后,SDS-PAGE分析显示糖基化产物分子量明显增大,小分子糖与肌原纤维蛋白反应更快;糖基化反应使肌原纤维蛋白的溶解性显著提高,表面疏水性降低;此外,肌原纤维蛋白二级结构明显改变,β-转角含量显著升高,β-折叠含量降低。糖基化反应未能改善肌原纤维蛋白的热稳定性。反应后的肌原纤维蛋白具有更好的起泡性及起泡稳定性,但乳化性和乳化稳定性降低。肌原纤维蛋白糖基化后在高离子浓度氯化钠(NaCl)溶液中比在低离子浓度溶液中具有更高的乳化和起泡能力。同时,经糖基化改性的蛋白在低离子浓度时的溶解性和起泡能力也能得到明显改善。
关键词: 鸢乌贼, 肌原纤维蛋白, 糖基化, 乳化性, 起泡能力
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