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自制环保酵素对水产病原菌的抑制效果及其发酵菌株的分离鉴定

王洋 赵井 王竞儒 罗云龙 刘颖 白东清 邵蓬 李语涵

王洋, 赵井, 王竞儒, 罗云龙, 刘颖, 白东清, 邵蓬, 李语涵. 自制环保酵素对水产病原菌的抑制效果及其发酵菌株的分离鉴定[J]. 南方水产科学. doi: 10.12131/20200101
引用本文: 王洋, 赵井, 王竞儒, 罗云龙, 刘颖, 白东清, 邵蓬, 李语涵. 自制环保酵素对水产病原菌的抑制效果及其发酵菌株的分离鉴定[J]. 南方水产科学. doi: 10.12131/20200101
Yang WANG, Jing ZHAO, Jingru WANG, Yunlong LUO, Ying LIU, Dongqing BAI, Peng SHAO, Yuhan LI. Inhibitory activity of home-made garbage enzyme against aquatic pathogens and isolation and identification of its fermentation strains[J]. South China Fisheries Science. doi: 10.12131/20200101
Citation: Yang WANG, Jing ZHAO, Jingru WANG, Yunlong LUO, Ying LIU, Dongqing BAI, Peng SHAO, Yuhan LI. Inhibitory activity of home-made garbage enzyme against aquatic pathogens and isolation and identification of its fermentation strains[J]. South China Fisheries Science. doi: 10.12131/20200101

自制环保酵素对水产病原菌的抑制效果及其发酵菌株的分离鉴定

doi: 10.12131/20200101
基金项目: 国家自然科学基金青年项目 (31702360);天津市科技计划项目 (18YFZCNC01190);国家级大学生创新创业训练计划项目 (201910061016)
详细信息
    作者简介:

    王洋:王 洋 (1986—),女,博士,讲师,从事水产微生物研究。E-mail: 474221161@qq.com

    通讯作者:

    白东清 (1970—),女,博士,教授,从事水产动物营养与饲料学研究。E-mail: baidongqing@tjau.edu.cn

  • 中图分类号: S 943

Inhibitory activity of home-made garbage enzyme against aquatic pathogens and isolation and identification of its fermentation strains

  • 摘要: 为探讨自制环保酵素对水产病原微生物的抑制作用,该研究对其发酵菌株进行了分离。通过比浊法和平板划线法,确定自制环保酵素对水产病原微生物坎氏弧菌SP-1 (Vibrio campbellii SP-1)、哈维氏弧菌SP-1 (V. harveyi SP-1)、轮虫弧菌SP-1 (V. rotiferianus SP-1) 和嗜水气单胞菌245 (Aeromonas hydrophila) 的最低抑制浓度分别是体积分数是体积分数为11.5%、11%、6.2%和11%,最小杀菌浓度分别是体积分数为16%、16%、16%和12%。攻毒保护试验表明,自制环保酵素无菌上清液可使嗜水气单胞菌对斑马鱼 (Danio rerio) 的致死率降低 (90.5±6.49) %。pH、温度、蛋白酶敏感性试验显示自制环保酵素的主要抗菌活性物质为酸性物质,对加热和蛋白酶处理稳定。进一步从环保酵素中分离主要发酵菌株,通过ITS序列分析鉴定为库德毕赤酵母 (Pichia kudriavzevii)。研究结果可为自制环保酵素在水产养殖中对抗细菌性疾病的应用提供理论基础。
  • 图  1  环保酵素无菌上清液对水产病原菌的生长抑制作用

    Figure  1.  Inhibitory activity of sterile supernatant of garbage enzyme against aquatic pathogens

    图  2  自制环保酵素无菌上清液对嗜水气单胞菌攻毒斑马鱼的保护作用

    **. 组间数据有显著差异 (P<0.01)

    Figure  2.  Protective effect of sterile supernatant of home-made garbage enzyme on Danio rerio challenged with A. hydrophila

    **. Very significant difference between different columns (P<0.01).

    图  3  不同温度 (a)、蛋白酶 (b) 和pH (c) 处理后对酵素的抑菌效果

    不同字母表示有显著性差异 (P<0.05)

    Figure  3.  Effect of heating (a), protease (b) and pH (c) on inhibitory activity of home-made garbage enzyme against aquatic pathogens

    Different letters indicate significant differences (P<0.05).

    图  4  自制环保酵素发酵菌株bj001的菌落和菌体形态

    a. bj001菌落形态;b. bj001菌体在光学显微镜下的形态 (放大倍数10×100)

    Figure  4.  Colony and cell morphology of fermentation strain bj001 from home-made garbage enzyme

    a. Colony morphology of bj001; b. Morphological characteristics of bj001 cells under light optical microscope (Magnification 10×100)

    图  5  基于ITS序列构建的库德毕赤酵母bj001系统发育树

    Figure  5.  Phylogenetic tree of P. kurdii bj001 constructed based on ITS sequence

    表  1  自制环保酵素无菌上清液对水产病原菌的致死作用

    Table  1.   Lethal effects of sterile supernatant of home-made garbage enzyme against aquatic pathogens

    病原菌
    Pathogen
    酵素体积分数 Enzyme volume fraction/%
    17.016.516.015.515.014.514.013.513.012.512.011.010.0
    嗜水气单胞菌 245 A. hydrophila 245 + +
    轮虫弧菌 SP-1 V. rotifer SP-1 + + + + + + + + + +
    哈维氏弧菌 SP-1 V. harveyi SP-1 + + + + + + + + + +
    坎氏弧菌 SP-1 V. candida SP-1 + + + + + + + + + +
    注:+. 平板上有菌落生长;−. 无菌落 Note: +. Growth of bacterial colony on agar; −. No colony
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出版历程
  • 收稿日期:  2020-05-11
  • 修回日期:  2020-07-14
  • 网络出版日期:  2020-11-05

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