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17β-雌二醇诱导黄颡鱼雌性化的研究

王成龙 关文志 李永强 刘峰

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17β-雌二醇诱导黄颡鱼雌性化的研究

    作者简介: 王成龙 (1989—),男,硕士,助理工程师,从事水产动物遗传育种研究。E-mail: 836597116@qq.com;
    通讯作者: 刘峰, lf6475@sina.com
  • 中图分类号: S 917.4

Study on 17β-estradiol induced feminization of Pelteobagrus fulvidraco

    Corresponding author: Feng LIU, lf6475@sina.com
  • CLC number: S 917.4

  • 摘要: 该研究通过对17β-雌二醇 (E2) 的投喂方式和投喂时间进行比较,探索了XY全雄黄颡鱼 (Pelteobagrus fulvidraco) 的雌性化方法,进而建立3个家系 (XY♀×XY♂),结合性别分子标记对黄颡鱼雌性化诱导的成活率和性逆转率进行了对比研究。结果显示,卤虫 (Artemia sp.) 组从开口第1天进行诱导的性逆转率为75.20%,而从开口第5天进行诱导得不到发育好的雌性;从开口第1天投喂激素,饲料组的成活率与卤虫组无显著差异 (P>0.05),而性逆转率显著高于卤虫组 (P<0.05);分子标记Y1和Y2相结合能够准确鉴定黄颡鱼的遗传性别;对照组中3个家系的成活率和各个基因型性别比例均无显著差异(P>0.05),成活率为51.00%~56.67%,XX雌性占比为90.91%~97.44%,XY雄性占比为94.56%~95.96%,而YY则为雄性;诱导组中3个家系的成活率和性逆转率均无显著差异(P>0.05)。结果表明,采用含50 mg·kg−1 E2的微颗粒饲料从开口第1天开始诱导30 d,并运用遗传性别与表型性别鉴定相结合的方法能够有效筛选获得发育良好的XY/YY雌性黄颡鱼。
  • 图 1  分子标记Y1和Y2在正常黄颡鱼 (XX,XY) 中PCR扩增条带电泳图

    Figure 1.  Electrophoresis of PCR amplified bands of molecular markers Y1 and Y2 in P. fulvidraco (XX, XY)

    图 2  分子标记Y1和Y2在黄颡鱼家系 (XY♀×XY♂) 部分个体PCR扩增条带电泳图

    Figure 2.  Electrophoresis of PCR amplified bands of molecular markers Y1 and Y2 in some individuals of P. fulvidraco family (XY♀×XY♂)

    表 1  17β-雌二醇处理的两种饵料对黄颡鱼雄鱼 (XY) 成活率和性逆转率的影响

    Table 1.  Effects of two kinds of bait treated by E2 on survival rate and sex reversal rate of male P. fulvidraco (XY)

    指标
    Index
    卤虫组
    Artemia sp. group
    饲料组
    Feed group
    对照组
    Control group
    开口第几天投喂 Feeding on nth day of opening 1 5 1 1
    发育好 Well developed/尾 27.33±6.57a 0.00±0.00b 39.33±5.70a 0.00±0.00b
    发育差 Poorly developed/尾 7.33±1.33a 38.67±2.40b 0.00±0.00c 0.00±0.00c
    雄性 Male/尾 1.33±1.33a 8.00±1.15b 0.00±0.00a 79.67±3.18c
    成活率 Survivall rate/% 36.00±7.57a 46.67±2.40a 39.33±5.70a 79.67±3.18b
    性逆转率 Sex reversal rate/% 75.20±2.72a 0.00±0.00b 100.00±0.00c 0.00±0.00b
    注:同一行数字上的不同字母表示差异显著 (P<0.05) Note: The values with different letters within the same row indicate significant difference (P<0.05).
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    表 2  3个家系正常组的成活率及各个基因型性别比例统计

    Table 2.  Statistics of survival rate and sex ratio of each genotype in three normal families

    基因型及指标
    Genotype and index
    家系1
    Family 1
    家系2
    Family 2
    家系3
    Family 3
    XX/尾 雌性 Female 12.00±2.52a 9.33±2.91a 14.67±1.45a
    雄性 Male 1.00±0.58a 0.67±0.33a 0.33±0.33a
    XY/尾 雌性 Female 1.33±0.33a 1.33±0.33a 2.00±1.00a
    雄性 Male 29.33±2.33a 33.33±3.18a 33.33±5.70a
    YY/尾 雌性 Female 0.00±0.00a 0.00±0.00a 0.00±0.00a
    雄性 Male 7.67±0.67a 6.33±0.67a 6.33±0.67a
    成活率 Survival rate/% 51.33±5.04a 51.00±5.51a 56.67±8.09a
    XX雌性率 XX Female rate/% 90.91±5.25a 94.75±2.72a 97.44±2.56a
    XY雄性率 XY Male rate/% 95.74±0.75a 95.96±1.32a 94.56±0.79a
    YY雄性率 YY Male rate/% 100.00±0.00a 100.00±0.00a 100.00±0.00a
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    表 3  3个家系诱导组的成活率及性逆转率统计

    Table 3.  Statistics of survival rate and sex reversal rate of three induced families

    基因型及指标
    Genotype and index
    家系1
    Family 1
    家系2
    Family 2
    家系3
    Family 3
    雌性 Female/尾 29.50±7.50a 51.00±2.00a 38.50±7.50a
    雄性 Male/尾 1.00±1.00a 2.50±0.50a 1.50±0.50a
    XX/尾 6.50±0.50a 12.50±0.50b 8.00±0.00a
    XY/尾 17.00±5.00 a 27.50±1.50 a 28.50±5.50 a
    YY/尾 7.00±3.00a 13.50±0.50a 3.50±2.50a
    成活率
    Survival rate/%
    20.34±5.67a 35.67±1.00a 26.67±5.34a
    性逆转率
    Sex reversal rate/%
    97.00±3.00a 94.00±1.00a 95.55±0.50a
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出版历程
  • 收稿日期:  2020-01-06
  • 录用日期:  2020-02-18
  • 网络出版日期:  2020-06-05
  • 刊出日期:  2020-06-01

17β-雌二醇诱导黄颡鱼雌性化的研究

    作者简介:王成龙 (1989—),男,硕士,助理工程师,从事水产动物遗传育种研究。E-mail: 836597116@qq.com
    通讯作者: 刘峰, lf6475@sina.com
  • 上海市水产研究所/上海市水产技术推广站,上海 200433

摘要: 该研究通过对17β-雌二醇 (E2) 的投喂方式和投喂时间进行比较,探索了XY全雄黄颡鱼 (Pelteobagrus fulvidraco) 的雌性化方法,进而建立3个家系 (XY♀×XY♂),结合性别分子标记对黄颡鱼雌性化诱导的成活率和性逆转率进行了对比研究。结果显示,卤虫 (Artemia sp.) 组从开口第1天进行诱导的性逆转率为75.20%,而从开口第5天进行诱导得不到发育好的雌性;从开口第1天投喂激素,饲料组的成活率与卤虫组无显著差异 (P>0.05),而性逆转率显著高于卤虫组 (P<0.05);分子标记Y1和Y2相结合能够准确鉴定黄颡鱼的遗传性别;对照组中3个家系的成活率和各个基因型性别比例均无显著差异(P>0.05),成活率为51.00%~56.67%,XX雌性占比为90.91%~97.44%,XY雄性占比为94.56%~95.96%,而YY则为雄性;诱导组中3个家系的成活率和性逆转率均无显著差异(P>0.05)。结果表明,采用含50 mg·kg−1 E2的微颗粒饲料从开口第1天开始诱导30 d,并运用遗传性别与表型性别鉴定相结合的方法能够有效筛选获得发育良好的XY/YY雌性黄颡鱼。

English Abstract

  • 黄颡鱼 (Pelteobagrus fulvidraco) 是一种小型底栖杂食性鱼类,隶属鲶形目、鲿科、黄颡鱼属,为我国重要的淡水养殖品种,至2018年全国黄颡鱼产量已达50万吨[1]。黄颡鱼雄性个体生长速度比雌性快约30%[2],表现出明显的生长优势,同时雄性肉质较雌性更加细嫩鲜美,因此培育全雄黄颡鱼是提高我国黄颡鱼养殖产量和品质的重要途径。刘汉勤等[2]培育的全雄黄颡鱼在2011年被国家水产原种和良种审定委员会审定为黄颡鱼“全雄1号” (GS-04-001-2010)。全雄苗的推广促进了黄颡鱼健康养殖发展,但近几年由于其亲本超雄鱼退化、母本来源混杂,制约了全雄黄颡鱼苗的生产应用[3]

    黄颡鱼人工授精目前只能通过杀雄取精的方法实现,通过传统测交辨别其父本遗传基因型的方法不仅验证时间长,而且损失父本,不利于生产应用。采用性别分子标记可使此问题得到有效解决。Wang等[4]通过BSA (Bulked segregant analysis) 建立与个体筛选相结合的方法开发出黄颡鱼X和Y染色体连锁的SCAR标记。但此标记只在特定群体中可有效鉴别,不能广泛应用到所有黄颡鱼遗传基因型鉴定。Dan等[5]运用基因组步移技术对等位基因Pf62-XPf62-Y侧翼的基因组序列进行筛选,得到能广泛鉴定黄颡鱼不同群体性别的分子标记。孙源[6]运用ISSR (Inter simple sequence repeat) 和TRAP (Target region amplified polymorphism) 技术从肇东黄颡鱼群体筛选得到4个位点可作为性别鉴定的特异性分子标记。

    17β-雌二醇 (E2) 是最具代表性生物体内天然雌激素之一[7]。姚道霞[8]用20 mg·kg−1 E2处理饲料诱导黄颡鱼得到雌性占比83.6%;刘汉勤等[2]用卤虫 (Artemia sp.) 作为17-α乙炔基雌二醇载体 (200 μg·L−1) 诱导黄颡鱼得到95%以上的转性率;杨天毅等[3]用芳香化酶抑制剂来曲唑 (1 000 mg·kg−1) 诱导出精巢发育良好的XX生理雄鱼。由此可见,黄颡鱼经过不同的激素处理方法得到性逆转效果有所差异。本文研究了饵料投喂方式和投喂开始时间,探索E2诱导黄颡鱼雌性化的方法,同时利用性别分子标记和生物形态特性相结合筛选获得XY/YY雌性黄颡鱼,为全雄黄颡鱼生产奠定基础。

    • 在江苏盐城海丰光明渔业有限公司用黄颡鱼 (XX,♀) ×超雄黄颡鱼 (YY,♂) 进行人工授精,取2.5万尾全雄黄颡鱼水花 (出膜4 d) 运回实验室进行雌性化诱导建立XY生理雌鱼群体。从扬州宝应某鱼苗场运回的1万尾黄颡鱼水花正常饲养,用于构建家系选育的父本群体。

    • 分别采用E2拌入微颗粒饲料 (质量分数为50 mg·kg−1,简称饲料组,购自青岛七好营养科技有限公司,主要成分为粗蛋白≥48%,粗脂肪≥8%,粗纤维≤3%,粗灰分≤16%,钙 (Ca)≥1.5%,氯化钠≤3.5%,总磷≥1%,赖氨酸≥2.5%,水分≤12%) 和浸泡卤虫 (质量浓度为50 μg·L−1,简称卤虫组) 投喂30 d的方法对全雄黄颡鱼水花进行性逆转试验,卤虫组设置开口第1和第5天开始投喂的2个试验组,每组设3个重复组;饲料组设置开口第1天投喂,3个重复组;对照组为从开口第1天投喂卤虫,设3个重复组。每个重复组均为100尾,在50 L玻璃缸进行,试验期间水温保持在25 ℃、溶解氧 (DO) 质量浓度6 mg·L−1,每天投喂3次,投喂量以1 h后缸底有少量残饵为准,及时清理残饵粪便,每隔2 d换掉1/3水量。停止投喂激素后每个重复组均采用微颗粒饲料,冬季期间进行加温,使水温保持在25 ℃。

      以XY生理雌鱼为母本、XY雄鱼为父本进行繁育,建立3个家系进行试验,每个家系设置诱导组和对照组,诱导组均设2个重复组,每组150尾,对照组均设3个重复组,每组100尾。采用E2拌入微颗粒饲料 (质量分数为50 mg·kg−1) 投喂30 d的方法进行诱导,每个重复组均在30 L玻璃缸、水温保持25 ℃、ρ (DO) 6 mg·L−1的水体进行。

    • 取50 mg E2 (Sigma,德国) 粉末加入至100 mL的95%乙醇中,均匀搅拌使其充分溶解,制作成E2母液 (1 g·L−1),4 ℃避光保存,取适量E2母液加入至孵化好的卤虫中富集1 h,过滤后进行投喂。

      将E2粉末加入至无水乙醇中充分溶解,将其倒入微颗粒饲料中,搅拌均匀后放置60 min,然后将微颗粒饲料平铺放置通风橱中进行12 h自然干燥处理,揉搓成微颗粒后进行投喂,饲料于−20 ℃避光保存。

    • 选取黄颡鱼正常雌性、雄性各6尾剪鳍采样,参照北京天根生物有限公司的海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒 (离心柱型) 说明书介绍的方法提取样品基因组DNA后,用0.8%的琼脂糖凝胶电泳和分光光度计检测DNA质量和浓度,−20 ℃保存备用。参照Dna等[5]设计2对引物 (Y1-F: GATGCAGAACAGGAACATTGTG,Y1-R: GCCACCACTTGACCTGATC,Y2-F: ACCCACGCCGCCCACACTC,Y2-R: ACCTGCCAGTGTAGTGGGAC) 送至上海生工生物工程技术服务有限公司进行合成。采用PCR扩增体系:25 μL:2×Es Taq Master Mix (Dye) 12.5 μL,上下游引物各0.5 μL (10 μmol·μL−1),DNA模板2 μL (50 ng·μL−1),ddH2O补至9.5 μL。反应程序为94 ℃变性3 min,59 ℃退火30 s,72 ℃ 延伸40 s,34个循环,最后72 ℃延伸5 min。得到的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,利用凝胶电泳成像系统分析片段长度鉴别XX和XY个体。之后对所有XY♀×XY♂家系的性成熟个体均注射PIT电子标记,并剪鳍采样,利用分子标记鉴定遗传性别。

      在繁殖期间,性成熟的黄颡鱼雌鱼腹部膨胀圆滑、生殖孔红润,雄性具有生殖突,根据腹部、生殖孔的外观及生殖突的有无进行表型性别的鉴定。

    • 试验数据以“平均值±标准误 ($\overline { X}{ \pm {\rm{SE}}} $)”表示,结果用SPSS 22.0软件对数据进行单因素方差分析 (One-Way ANOVA),并且运用Duncan's进行多重比较检验组间差异,P<0.05表示差异显著。

    • 经过1年的养殖,统计各组个体的成活率,并对每个个体的表型性别及发育情况进行检查。对照组的成活率为79.67%,且未出现雌性个体,说明试验鱼苗为全雄苗;卤虫组中从开口第5天诱导不能得到发育好的雌性,而从开口第1天诱导性逆转率为75.20%;饲料组从开口第1天诱导得到成活率与卤虫组无显著差异(P>0.05),而性逆转率显著高于卤虫组 (P<0.05,表1)。

      指标
      Index
      卤虫组
      Artemia sp. group
      饲料组
      Feed group
      对照组
      Control group
      开口第几天投喂 Feeding on nth day of opening 1 5 1 1
      发育好 Well developed/尾 27.33±6.57a 0.00±0.00b 39.33±5.70a 0.00±0.00b
      发育差 Poorly developed/尾 7.33±1.33a 38.67±2.40b 0.00±0.00c 0.00±0.00c
      雄性 Male/尾 1.33±1.33a 8.00±1.15b 0.00±0.00a 79.67±3.18c
      成活率 Survivall rate/% 36.00±7.57a 46.67±2.40a 39.33±5.70a 79.67±3.18b
      性逆转率 Sex reversal rate/% 75.20±2.72a 0.00±0.00b 100.00±0.00c 0.00±0.00b
      注:同一行数字上的不同字母表示差异显著 (P<0.05) Note: The values with different letters within the same row indicate significant difference (P<0.05).

      表 1  17β-雌二醇处理的两种饵料对黄颡鱼雄鱼 (XY) 成活率和性逆转率的影响

      Table 1.  Effects of two kinds of bait treated by E2 on survival rate and sex reversal rate of male P. fulvidraco (XY)

    • 黄颡鱼XX个体中只有标记Y2显示条带,在XY个体中标记Y1和标记Y2均显示条带,表明Y1在Y性染色体上,Y2在X性染色体上 (图1)。Y1和Y2均显示条带的个体为XY (序号49—54、56、58、64的个体);仅有Y1显示条带的个体为YY (序号55的个体);仅有Y2显示条带的个体为XX (序号57、59—63的个体,图2)。

      图  1  分子标记Y1和Y2在正常黄颡鱼 (XX,XY) 中PCR扩增条带电泳图

      Figure 1.  Electrophoresis of PCR amplified bands of molecular markers Y1 and Y2 in P. fulvidraco (XX, XY)

      图  2  分子标记Y1和Y2在黄颡鱼家系 (XY♀×XY♂) 部分个体PCR扩增条带电泳图

      Figure 2.  Electrophoresis of PCR amplified bands of molecular markers Y1 and Y2 in some individuals of P. fulvidraco family (XY♀×XY♂)

    • 对照组的3个家系成活率和各个基因型性别比例均无显著差异 (P>0.05),成活率为51.00%~56.67%,XX型雌性个体所占比例为90.91%~97.44%,XY型雄性则为94.56%~95.96%,而YY型个体均表现为雄性 (表2)。

      基因型及指标
      Genotype and index
      家系1
      Family 1
      家系2
      Family 2
      家系3
      Family 3
      XX/尾 雌性 Female 12.00±2.52a 9.33±2.91a 14.67±1.45a
      雄性 Male 1.00±0.58a 0.67±0.33a 0.33±0.33a
      XY/尾 雌性 Female 1.33±0.33a 1.33±0.33a 2.00±1.00a
      雄性 Male 29.33±2.33a 33.33±3.18a 33.33±5.70a
      YY/尾 雌性 Female 0.00±0.00a 0.00±0.00a 0.00±0.00a
      雄性 Male 7.67±0.67a 6.33±0.67a 6.33±0.67a
      成活率 Survival rate/% 51.33±5.04a 51.00±5.51a 56.67±8.09a
      XX雌性率 XX Female rate/% 90.91±5.25a 94.75±2.72a 97.44±2.56a
      XY雄性率 XY Male rate/% 95.74±0.75a 95.96±1.32a 94.56±0.79a
      YY雄性率 YY Male rate/% 100.00±0.00a 100.00±0.00a 100.00±0.00a

      表 2  3个家系正常组的成活率及各个基因型性别比例统计

      Table 2.  Statistics of survival rate and sex ratio of each genotype in three normal families

    • 诱导组的3个家系中存在极少数雄性个体,成活率无显著差异 (P>0.05),为20.34%~35.67%;性逆转率不存在显著差异 (95.55%~97.00%,P>0.05,表3)。

      基因型及指标
      Genotype and index
      家系1
      Family 1
      家系2
      Family 2
      家系3
      Family 3
      雌性 Female/尾 29.50±7.50a 51.00±2.00a 38.50±7.50a
      雄性 Male/尾 1.00±1.00a 2.50±0.50a 1.50±0.50a
      XX/尾 6.50±0.50a 12.50±0.50b 8.00±0.00a
      XY/尾 17.00±5.00 a 27.50±1.50 a 28.50±5.50 a
      YY/尾 7.00±3.00a 13.50±0.50a 3.50±2.50a
      成活率
      Survival rate/%
      20.34±5.67a 35.67±1.00a 26.67±5.34a
      性逆转率
      Sex reversal rate/%
      97.00±3.00a 94.00±1.00a 95.55±0.50a

      表 3  3个家系诱导组的成活率及性逆转率统计

      Table 3.  Statistics of survival rate and sex reversal rate of three induced families

    • 在黄颡鱼性逆转研究中关于浸浴法和投喂法报道较多。浸浴法一般运用在冷水鱼类的胚胎和孵化后期,而投喂法操作简单但易因饵料大小影响摄食,其中投喂法以卤虫和饲料作为处理载体为主。姚道霞[8]采用E2处理饲料投喂的方式得到雌性占比为83.6%,刘汉勤等[2]研究显示E2处理以卤虫作为载体的成活率和雌性率均比人工配合饲料的效果好。本研究采用E2处理的卤虫和饲料作为载体对黄颡鱼从开口第1天进行诱导30 d,成活率表现为饲料组比卤虫组稍高,但无显著差异 (P>0.05);而在性逆转率方面,饲料组为100%,卤虫组为75.2%,存在显著差异 (P<0.05)。这表明E2处理饲料作为载体对黄颡鱼性逆转效果较好。不同研究者采用不同饵料对黄颡鱼雌性化诱导试验结果有所不同,可能由饵料差异导致。此外,性逆转效果跟激素种类、激素浓度、诱导起止时间和温度等密切相关。Hendry等[9]用10 μg∙g−1 E2处理未分化的大西洋庸鲽 (Hippoglossus hippoglossus) 得到74%的雌性率,Park等[10]用40 μg∙g−1 E2浸浴破膜3~20 d的黄颡鱼获得全雌子代,刘少军和刘筠[11]用100 μg∙g−1 E2处理的饲料从破膜3 d的革胡子鲇 (Clarias lazere) 诱导90 d得到较高的性转化率。可见,E2诱导鱼类雌性化试验方案存在差异,这与鱼类的性别分化时间密切相关。黄颡鱼性别分化时间随着温度不同而有所变化,雌性分化时间早于雄性,在出苗13 d后出现卵巢分化趋势[8],游鑫等[12]研究显示在27 ℃条件下黄颡鱼15日龄原始性腺开始出现2种分化形态。本研究显示在投喂30 d的前提下,利用50 μg·L−1 E2处理卤虫从开口第1天诱导性逆转率为75.20%,而从开口第5天开始诱导得不到发育良好的XY生理雌鱼。因此,雌性化诱导时间宜早不宜迟,以免错过最佳性逆转时期。

      本研究表明,卤虫组和饲料组的成活率均明显低于对照组,诱导组中3个家系的成活率低于对照组,运用E2诱导黄颡鱼雌性化过程中呈现一定程度的致死效应,但有关E2对鱼类毒性研究较少。Fuzzen等[13]研究证明E2能干扰斑马鱼 (Barchydanio rerio var) 内分泌系统的正常功能,Jin等[14]研究显示E2对青鳉 (Oryzias latipe) 的毒性作用会受温度和光周期影响,李国超[15]研究得出E2会抑制斑马鱼细胞增殖和增强皮肤屏障作用,周锋祺等[16]研究发现E2对小黄鱼 (Larimichthys polyactis) 的生长有负面影响,Cravalho等[17]研究表明50、100 mg∙kg−1 E2对小锯盖鱼 (Centropomus undecimalis) 体长和体质量均有抑制作用,Blazquez等[18]发现E2抑制舌齿鲈 (Dicentrarchus labrax) 体质量增长,而Malison等[19]研究表明用含有15 μg∙g−1 E2 的饲料投喂金鲈 (Perca flavescens) 可促进其体质量增加,张晓彦和刘海金[20]将25日龄半滑舌鳎 (Cynoglossus semilaevis) 稚鱼放入不同质量浓度 (1、3、10 和30 μg·L−1) 的E2水溶液中,发现其对半滑舌鳎的早期生长和死亡率无显著影响,激素诱导鱼类性逆转化存在阈值现象,处理强度在阈值之内时对成活率无显著影响,超出阈值导致成活率降低[18]。因此阈值现象在鱼类性逆转试验中采用的激素浓度具有重要参考价值,在均衡成活率和性逆转率方面探索出有效的诱导方案。3个家系 (XY♀×XY♂) 子代的XX∶XY∶YY比例显示,对照组为1∶2.65∶0.54,而诱导组为1∶2.7∶0.88,两者之间无显著差异(P>0.05),表明E2对黄颡鱼不同基因型的成活率影响差异不大,但对不同基因型的致死效应是否一致有待进一步考证。

      鱼类的性别分化除了遗传基因决定外,还受环境因子影响[21-22]。许多研究学者已对环境因子 (光周期、pH、盐度,温度和社会因子等) 影响鱼类性别分化做了大量研究,其中温度是最受关注的环境因子之一[23-27]。由于试验均在25 ℃水体中进行,因此温度影响的可能性不大,但也不排除个体对温度的敏感程度存在差异。已有大量试验表明黄颡鱼性别决定体制为XX/XY,本研究对照组中3个家系 (XY♀×XY♂) 均存在少数雄性XX个体和雌性XY个体,而YY均为雄性,发现遗传性别和生理性别不一致的现象。刘汉勤等[2]研究显示不同家系正常交配后代雌性占比存在显著差异,推测由常染色体性修饰基因造成。有研究发现性别决定基因在未分化性腺早期能指导其发育成精巢或卵巢[28]。Masuyama等[29]研究显示青鳉Dmrt1基因突变会引起雄性向雌性逆转,Takehana等[30]研究表明Sox3基因在恒河青鳉过表达能产生XX雄鱼,谢彬月等[31]在黄颡鱼性腺转录组数据中筛选得到13个相关基因。目前,关于黄颡鱼的性别决键基因的验证尚未见报道。黄颡鱼的性别决定机制需要进一步探究,同时启示在全雄黄颡鱼选育中对亲本遗传背景的选择至关重要。

      综上所述,采用含50 mg·kg−1 E2的微颗粒饲料从开口第1天开始诱导30 d,同时利用性别分子标记和生物形态特性相结合能够筛选获得XY/YY雌性黄颡鱼,为全雄黄颡鱼生产奠定基础。

参考文献 (31)

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