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锦鲤早期发育过程中色素代谢相关酶的活性和基因表达g变化

殷浩然 罗明坤 王兰梅 董在杰 朱文彬 傅建军

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锦鲤早期发育过程中色素代谢相关酶的活性和基因表达g变化

    作者简介: 殷浩然(1995— ),男,硕士研究生,从事水产动物遗传育种研究。E-mail:1334733261@qq.com;
    通讯作者: 董在杰, dongzj@ffrc.cn
  • 中图分类号: S 965.8

Changes of pigment-related enzyme activity and gene expression at early developmental stage of Koi carp

    Corresponding author: Zaijie DONG, dongzj@ffrc.cn ;
  • CLC number: S 965.8

  • 摘要: 通过显微观察、酶联免疫吸附及荧光定量PCR等方法,探究了红白、红黑锦鲤(Cyprinus carpio var. Koi) F1代早期体色发育过程及不同发育时期色素代谢相关酶的活性(酪氨酸酶、胱氨酸酶)和基因(agoutimc1rmitftyr)的表达变化。结果表明,锦鲤出膜后呈淡黄色半透明,黑色素细胞在出膜8 d后开始出现。胱氨酸酶活性随锦鲤发育呈升高趋势,出膜7 d后显著升高(P<0.05);7日龄仔鱼前,红黑组与红白组间无显著差异(P>0.05);出膜7 d后,红黑组比同时期红白组显著升高(P<0.05)。酪氨酸酶在锦鲤发育过程中也呈升高趋势,但略有起伏,眼色素积累期及出膜23 d后,酪氨酸酶活性均比相邻各期高(P<0.05);组间比较发现发育各期,红黑组均比红白组高(P<0.05)。表明酪氨酸酶、胱氨酸酶活性变化与锦鲤色素细胞发育存在密切关联。agoutimc1rmitftyr 4个基因均在原肠期与神经胚期时表达最高(P<0.01),随后都呈下降趋势,意味着这4个基因可能在胚胎发育早期的体色形成过程中发挥着重要作用。
  • 图 1  锦鲤早期发育体色变化

    Figure 1.  Change of body color at early developmental stage of Koi carp

    图 2  红黑组与红白组发育过程中胱氨酸酶活性的变化

    Figure 2.  Change of cystinase activity during embryonic development of Kohaku group and Hi-Utsuri group

    图 3  红黑组与红白组发育过程中酪氨酸酶活性的变化

    Figure 3.  Chang of tyrosinase activity during embryonic development of Kohaku group and Hi-Utsuri group

    图 4  agouti基因在锦鲤不同发育时期表达量

    Figure 4.  agouti gene expression at different developmental stage

    图 5  mc1r基因在锦鲤不同发育时期表达量

    Figure 5.  mc1r gene expression at different developmental stage

    图 6  mitf基因在锦鲤不同发育时期表达量

    Figure 6.  mitf gene expression at different developmental stage

    图 7  tyr基因在锦鲤不同发育时期表达量

    Figure 7.  tyr gene expression at different developmental stage

    表 1  实时荧光定量PCR引物

    Table 1.  Primer sequences used in real-time quantitative RT-PCR

    引物名称
    primer
    核苷酸序列(5′−3′)
    sequences
    tyr FCACGGTCTCCGATCTTCCC
    tyr RCATCACGCCAGTCCCAGTA
    mitf FACAACTCCTGCCCGTCTAAC
    mitf RCCGTTGTTGAGGTCCAGAGT
    agouti FAACTGCGTGCCGCTCTTGA
    agouti RTAAACAAGCCTTTGGGATCGGG
    mc1r FAGGAATCTCCACTCGCCAA
    mc1r RGCCCGTGCTCCGTCAATAA
    β-actin FAGTCAGCAGAGTTGGGTGCT
    β-actin RCACGGCATCATTACCAACTG
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    表 2  红白组F1代体色性状分离

    Table 2.  Segregation of body color characteristics of F1 generation in Kohaku group

    组别 group全红 red全白 white红白 Kohaku
    红白A Kohaku A个体数463200441
    百分比/%41.9418.139.95
    红白B Kohaku B个体数377180652
    百分比/%31.1814.8953.93
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    表 3  红黑组F1代体色性状分离

    Table 3.  Segregation of body color characteristics of F1 generation in Hi-Utsuri group

    组别 group全红 red红黑 Hi-Utsuri全白 white红白 Kohaku三色 Showa黑白 Shiro-Utsuri
    红黑A Hi-Utsuri A个体数31249829723313
    百分比/%27.0143.120.178.4020.171.13
    红黑B Hi-Utsuri B个体数9613466218403216
    百分比/%8.4711.835.8319.2435.5719.06
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    表 4  红黑组F1黑色斑纹分离

    Table 4.  Segregation of black pattern characteristics of F1 generation in H-Utsuri group

     组别 group有黑斑 pigmented无黑斑 unpigmented
    红黑A Hi-Utsuri A个体数744411
    比例1.81:1
    红黑B Hi-Utsuri B个体数753380
    比例1.98:1
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出版历程
  • 收稿日期:  2019-01-28
  • 录用日期:  2019-05-16
  • 网络出版日期:  2019-07-05

锦鲤早期发育过程中色素代谢相关酶的活性和基因表达g变化

    作者简介:殷浩然(1995— ),男,硕士研究生,从事水产动物遗传育种研究。E-mail:1334733261@qq.com
    通讯作者: 董在杰, dongzj@ffrc.cn
  • 1. 南京农业大学无锡渔业学院,江苏 无锡 214081
  • 2. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业农村部淡水渔业与种质资源利用重点实验室,江苏 无锡 214081

摘要: 通过显微观察、酶联免疫吸附及荧光定量PCR等方法,探究了红白、红黑锦鲤(Cyprinus carpio var. Koi) F1代早期体色发育过程及不同发育时期色素代谢相关酶的活性(酪氨酸酶、胱氨酸酶)和基因(agoutimc1rmitftyr)的表达变化。结果表明,锦鲤出膜后呈淡黄色半透明,黑色素细胞在出膜8 d后开始出现。胱氨酸酶活性随锦鲤发育呈升高趋势,出膜7 d后显著升高(P<0.05);7日龄仔鱼前,红黑组与红白组间无显著差异(P>0.05);出膜7 d后,红黑组比同时期红白组显著升高(P<0.05)。酪氨酸酶在锦鲤发育过程中也呈升高趋势,但略有起伏,眼色素积累期及出膜23 d后,酪氨酸酶活性均比相邻各期高(P<0.05);组间比较发现发育各期,红黑组均比红白组高(P<0.05)。表明酪氨酸酶、胱氨酸酶活性变化与锦鲤色素细胞发育存在密切关联。agoutimc1rmitftyr 4个基因均在原肠期与神经胚期时表达最高(P<0.01),随后都呈下降趋势,意味着这4个基因可能在胚胎发育早期的体色形成过程中发挥着重要作用。

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