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超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼粉中喹噁啉类药物及其主要代谢物的残留量

江永远 王强 李来好 王旭峰 赵东豪 蔡楠 关婉琪

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超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼粉中喹噁啉类药物及其主要代谢物的残留量

    作者简介: 江永远(1993-),男,硕士研究生,从事食品质量安全研究。E-mail: 852830802@qq.com;
    通讯作者: 李来好, laihaoli@163.com
  • 中图分类号: TS 254.7

Determination of quinoxalines and their major metabolites residues in fishmeal by ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry

    Corresponding author: Laihao LI, laihaoli@163.com ;
  • CLC number: TS 254.7

  • 摘要: 文章建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼粉中5种喹噁啉类药物及其2种主要代谢物残留量的方法。样品经乙腈-乙酸乙酯(1∶1, V/V)和1 mol·L–1盐酸分步提取,盐酸提取液进一步用乙酸乙酯反萃取,有机相经浓缩后,均用乙腈复溶,用PRiME HLB通过性固相萃取柱净化处理。样品以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,经Phenomenex Kinetex C18柱梯度洗脱分离,质谱采取正离子多反应监测模式进行检测。代谢物采用内标法定量,原药采用基质匹配外标法定量。结果表明,7种化合物在对应的浓度范围内线性关系良好(R2>0.994),2种代谢产物检测限为2 μg·kg–1,定量限为5 μg·kg–1;5种喹噁啉类药物检测限为1~10 μg·kg–1;定量限为2~20 μg·kg–1。在高、中、低三种添加浓度下7种化合物的平均回收率在64.4%~102.2%之间,相对标准偏差为3.2%~10.2%。方法灵敏度高、精密度好,能同时测定鱼粉中的喹噁啉类药物及其主要代谢物。
  • 图 1  定量限浓度加标MRM色谱图

    Figure 1.  MRM chromatograms of LOQ

    图 2  不同提取液配比对5种原药加标回收率的影响

    Figure 2.  Effect of different extractant volume ratios on recoveries of five drugs

    图 3  盐酸浓度对MQCA和QCA加标回收率的影响

    Figure 3.  Effect of hydrochloric acid concentration on recoveries of MQCA and QCA

    图 4  超声处理时间对MQCA和QCA加标回收率的影响

    Figure 4.  Effect of sonication time on recoveries of MQCA and QCA

    图 5  不同类型固相萃取柱对7种目标物加标回收率的影响

    Figure 5.  Effect of different types of SPE cartridge on recoveries of seven compounds

    表 1  梯度洗脱程序

    Table 1.  Gradient elution program

    t/min 流动相A/%
    mobile phase A
    流动相B/%
    mobile phase B
    0 10 90
    1.80 95 5
    3.00 95 5
    3.30 10 90
    5.00 10 90
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    表 2  喹噁啉类药物及其主要代谢物的质谱参数

    Table 2.  MS parameters of quinoxalines and its major metabolites

    化合物
    compound
    母离子/(m/z)
    parent ion
    子离子/(m/z)
    daughter ion
    碰撞能量E/eV
    collision energy
    锥孔电压E/V
    cone voltage
    3-甲基喹噁啉-2-羧酸 (MQCA) 189.0 145.2*/143.2 22/14 32
    喹噁啉-2-羧酸 (QCA) 175.0 101.9*/129.1 28/14 2
    喹噁啉-2-羧酸-D4 (QCA-D4) 179.0 135.2 28 2
    喹烯酮 (QCT) 306.9 103.1*/131.1 40/26 56
    喹赛多 (CYA) 271.9 129.1*/143.0 32/30 30
    喹乙醇 (OLA) 264.1 212.1*/142.9 28/22 4
    卡巴氧 (CBX) 262.9 231.0*/130.2 20/12 2
    乙酰甲喹 (MEQ) 218.9 143.1*/185.1 24/18 46
     注:*.定量离子
     Note: *. quantitative ion
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    表 3  基质标准曲线的线性范围、线性方程和相关系数

    Table 3.  Linear range and equations and correlation coefficients of matrix standard curve

    化合物
    compound
    线性范围/μg·L–1
    linear range
    线性方程
    linear equation
    相关系数R2
    correlation coefficient
    检测限/μg·kg–1
    LOD
    定量限/μg·kg–1
    LOQ
    3-甲基喹噁啉-2-羧酸 (MQCA) 10~200 Y=4 569.47X–1 591.88 0.999 2 5
    喹噁啉-2-羧酸 (QCA) 10~200 Y=883.32X–967.768 0.997 2 5
    喹烯酮 (QCT) 4~200 Y=3 690.52X+5 658.01 0.994 1 2
    喹赛多 (CYA) 4~200 Y=3 565.28X+791.096 0.996 1 2
    喹乙醇 (OLA) 4~200 Y=260.13X–358.032 0.998 1 2
    卡巴氧 (CBX) 4~200 Y=256.568X+577.777 0.997 1 2
    乙酰甲喹 (MEQ) 40~1000 Y=488.546X–606.712 0.998 10 20
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    表 4  样品加标回收率及相对标准偏差(n=5)

    Table 4.  Recovery and RSD of fortified samples (n=5)

    化合物 compound 添加水平/μg·kg–1 added level 平均回收率/% average recovery RSD/%
    3-甲基喹噁啉-2-羧酸 (MQCA) 5.0,10,100 94.8,102.2,91.6 3.2,3.5,4.1
    喹噁啉-2-羧酸 (QCA) 5.0,10,100 72.4,80.8,77.5 4.3,3.8,5.1
    喹烯酮 (QCT) 2.0,10,100 70.2,85.3,85.4 7.8,8.1,7.2
    喹赛多 (CYA) 2.0,10,100 70.7,71.7,73.8 6.4,7.8,5.1
    喹乙醇 (OLA) 2.0,10,100 87.1,89.7,94.9 9.4,8.6,6.8
    卡巴氧 (CBX) 2.0,10,100 70.6,75.8,85.3 8.4,8.9,6.2
    乙酰甲喹 (MEQ) 20,50,100 64.4,66.8,67.6 10.2,9.9,7.6
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出版历程
  • 收稿日期:  2018-12-13
  • 录用日期:  2019-01-14
  • 网络出版日期:  2019-02-18

超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼粉中喹噁啉类药物及其主要代谢物的残留量

    作者简介:江永远(1993-),男,硕士研究生,从事食品质量安全研究。E-mail: 852830802@qq.com
    通讯作者: 李来好, laihaoli@163.com
  • 1. 浙江海洋大学食品与医药学院,浙江 舟山 316022
  • 2. 中国水产科学研究院南海水产研究所,农业农村部水产品加工重点实验室,广东省渔业生态环境重点开放实验室,广东 广州 510300

摘要: 文章建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼粉中5种喹噁啉类药物及其2种主要代谢物残留量的方法。样品经乙腈-乙酸乙酯(1∶1, V/V)和1 mol·L–1盐酸分步提取,盐酸提取液进一步用乙酸乙酯反萃取,有机相经浓缩后,均用乙腈复溶,用PRiME HLB通过性固相萃取柱净化处理。样品以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,经Phenomenex Kinetex C18柱梯度洗脱分离,质谱采取正离子多反应监测模式进行检测。代谢物采用内标法定量,原药采用基质匹配外标法定量。结果表明,7种化合物在对应的浓度范围内线性关系良好(R2>0.994),2种代谢产物检测限为2 μg·kg–1,定量限为5 μg·kg–1;5种喹噁啉类药物检测限为1~10 μg·kg–1;定量限为2~20 μg·kg–1。在高、中、低三种添加浓度下7种化合物的平均回收率在64.4%~102.2%之间,相对标准偏差为3.2%~10.2%。方法灵敏度高、精密度好,能同时测定鱼粉中的喹噁啉类药物及其主要代谢物。

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